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Venins et activités biologiques (Vacbio, EA 4357, Albi)

Axes de recherche

Venins et activités biologiques (Vacbio, EA 4357, Albi)

Le projet scientifique de l'équipe « Venins et Activités Biologiques » s'inscrit dans la politique d'émergence de la recherche du CUFR. La démarche de reconnaissance de l'équipe s'est traduite par la mise en place de nouvelles thématiques. L'équipe a été reconnue équipe d'accueil (EA 4357) à mi-parcours du contrat 2006-2010 (janvier 2009) et reconduite en janvier 2010 avec la note globale A. Ce projet a pour but de découvrir des molécules à activité biologique, d'origine naturelle (venin de fourmis et hémolymphe d'abeille), susceptibles d'un développement dans les grands domaines industriels.


Projets scientifiques

  • Projet "venins de fourmis"

Ce projet a pour objectif de déterminer les activités biologiques des sécrétions venimeuses de deux fourmis exotiques (Tetramorium bicarinatum et Crematogaster striatula) et de caractériser les composés responsables de ces activités (thèse d'Aline RIFFLET).

L'analyse du venin de la fourmi Tetramorium bicarinatum a conduit à la découverte de deux peptides actifs sur des bactéries gram + et/ou -. L'un de ces peptides présente une activité assez large puisqu'il agit contre le Staphylocoque, la Legionelle, la Salmonelle et E. coli. L'ensemble des premiers résultats fait l'objet d'un article soumis au journal « Peptides ».

Compte tenu de l'originalité de la séquence de ce peptide, le dépôt d'un brevet est envisagé, à condition de mener des études complémentaires. Mais pour cela, différents points doivent être explorés : Il s'agit tout d'abord d'élargir le spectre d'action de ce composé, en particulier au niveau de champignons et de levures dont certains présentent aussi un intérêt sociétal fort (lutte contre les mycoses par exemple). Il s'agit également d'utiliser les techniques de pharmaco-modulation afin de modifier ce peptide en agissant sur sa lipophilie. Des tests de formulation et d'association à d'autres molécules actives sont également envisagés afin d'étudier le potentiel « synergique » du composé découvert.

D'un point de vue plus fondamental, nous envisageons d'explorer les mécanismes d'action de la molécule.
L'étude de sa structure spatiale par résonance magnétique nucléaire du proton et du carbone apportera des informations importantes quant à sa fixation (adhésion) à la membrane des cellules. En parallèle, nous étudierons le potentiel perturbateur des membranes cellulaires en utilisant des sondes fluorescentes.

Une des sécrétions de Crematogaster striatula, produite par la « glande de Dufour » a été analysée et caractérisée par chromatographie. Son effet paralysant, neurotoxique, voire létal a été démontré sur les termites (article PLoS one Rifflet et al. 2011).

 


  • Projet "Varroa et Immunité de l'abeille"

Etude de l'hémolymphe d'abeilles naturellement tolérantes à un acarien, le varroa. Ces souches d'abeilles ont développé des résistances qui pourraient résulter d'une « composition chimique différente » de l'hémolymphe. Ces abeilles pourraient ainsi constituer une source potentielle de molécules ayant des propriétés acaricides.

 


  • Projet Beethym

Dans le cadre d'une collaboration avec le CRCA (centre de recherche de cognition animale) l'équipe est partenaire d'un contrat régional de deux ans qui vise à comprendre les perturbations comportementales de l'abeille lorsqu'elle est traitée par du thymol contre son parasite le varroa. L'hypothèse repose sur l'idée que le thymol, substance utilisé comme anti-acaricide d'origine naturelle, pourrait avoir une part de responsabilité dans l'effondrement du cheptel apicole.

Des tests préalables ont confirmé le fait que cette molécule modifie le comportement de l'abeille même avec des doses d'exposition très faibles (article Bergougnoux et al. Apidologie). Deux fonctions semblent touchées : l'olfaction et la vision.

Ce projet propose d'expliquer l'action du thymol d'un point de vue physiologique. Il s'agit d'établir un lien entre la biosynthèse et l'activité biochimique des récepteurs de l'olfaction et de la vision, de l'expression de leurs gènes et la perturbation du comportement des abeilles. L'Association de Développement Apicole Midi-Pyrénées (ADAM) est partenaire du projet : elle assure la gestion de trois ruchers expérimentaux situés dans le Lauragais. Le projet est au stade de la modélisation et les études de terrain commenceront en avril 2012 avec le démarrage de la nouvelle saison de miellée.


  • Projet ValBiomasse (en cours de développement)

Valorisation bio-énergatique de biomasses et développement de technologies permettant de standardiser leur combustion (partenaires : VAcBio, Rapsodee et RAGT-énergie).

L'acte fondateur du CUFR recommande le développement d'une recherche partenariale avec le tissu économique local. Ainsi, sollicitée par la Société RAGTénergie pour son expertise dans les domaines de l'analyse biochimique et chimique et sur les questions environnementales (master Diagnostic en Environnement et Alimentation), l'équipe VAcBio dirige une thèse industrielle (ED SEVAB), en marge de son sujet principal, sur un projet intitulé ValBiomasse.

L'objectif de ce projet est donc de développer la filière énergétique des co-produits agricoles. Mais la combustion de ces biomasses pose plusieurs problèmes de combustion qui sont principalement : la production de cendres et surtout la production de mâchefer, des émissions qui peuvent être corrosives et/ou polluantes, des émissions de particules fines.

L'objectif de ce programme est d'accompagner la société RAGT énergie dans le développement d'un process permettant l'exploitation de ressources végétales. Ce process implique de développer des méthodes de formulations adaptées et le développement d'additifs de combustion. Une thèse entièrement financée par RAGT énergie a démarré en septembre 2011 (direction M. Treilhou).

 

 

 

 

Organisation

Composition

  • Wafa Bouzid, post doctorant
  • Jean-Luc Carayon, technicien de recherche
  • Gael Charpentier, post doctorant
  • Sabine Gavalda, post doctorant
  • Aline Rifflet, doctorante
  • Jérémy Tabart, post doctorant
  • Nathan Tene, ingénieur d'étude

 

 

Publications

Publications : revues internationales

  • Schreck E, Geret F, Gontier L, Treilhou M., (2008) Development and validation of a rapid multiresidue method for pesticide determination using gas chromatography-mass spectrometry : a realistic case in vineyard soils. Talanta 77(1):298-303
  • Schreck E, Geret F, Gontier L, Treilhou M., (2008) Neurotoxic effect and metabolic responses induced by a mixture of six pesticides on the earthworm Aporrectodea caliginosa nocturna. Chemosphere 71(10):1832-9
  • Schreck E, Geret F, Gontier L, Treilhou M. (2009) ChE, GST and CAT : evaluation of the efficiency of a combined buffer for protein extraction. Ecotoxicology Environmental Safety 72 (5) 1609-13
  • Sablayrolles C, Montréjaud-Vignoles M, Silvestre J, Treilhou M. (2009) Trace determination of linear alkylbenzene sulfonates: application in artificially polluted soil-carrots system. International Journal of Analytical Chemistry, 404836.
  • Amélie Vantaux, Olivier Roux, Alexandra Magro, Nathan Téné Ghomsi, Robert D. Gordon, Alain Dejean, Jérôme Orivel (2010) Host-Specific Myrmecophily and Myrmecophagy in the Tropical Coccinellid Diomus thoracicus in French Guiana, Biotropica, Volume 42, Issue 5, pages 622-629.
  • Sablayrolles C., Vialle C., Silvestre J., Treilhou M., Lhoutellier C., Brochier V., Montrejaud-Vignoles, M. (2011) PCBs uptake by carrots after sludge composts application : worst-case and operational practice in greenhouse conditions ; Fresenius Environmental Bulletin Vol. 20, 8, 2141-2149
  • Rifflet A., Tene N., Orivel J., Treilhou M., Dejean A., Vetillard A. (2011) Paralyzing action from a distance in an arboreal African ant species. Vol 6 (12), e28571 PLoS ONE.
  • Tabart J., Bolt M, Ferdy JB and Vetillard A. (2011) Links between Varroa destructor infestation and honeybee immunity. D-11-08889. PLoS ONE
  • Rifflet A., Gavalda S., Téné N., Orivel J., Leprince J., Guilhaudis L., Génin E., Vétillard A., Treilhou M. Identification by mass spectrometry of a novel antimicrobial peptide from the venom of the Brazilian ant Tetramorium bicarinatum (soumis Peptides)
  • Bergougnoux M., Treilhou M., Armengaud C., Exposure to thymol decreased phototactic behaviour in the honeybee (Apis mellifera) in laboratory conditions (soumis Apidologie).


Conférences ou affiches nationales et internationales

  • *Rifflet A, Tené N, Orivel J, Treilhou M and Vétillard A. Toxinology of the venoms from two exotic ants species. XII International Congress of Toxicology, Barcelona, Spain. July 2010.
  • *Tabart J. Bolt M. Treilhou M. and Vetillard A. Links between Varroa destructor infestation and honeybee immunity, International Union for the Study of Social Insects. XVI congress in Copenhagen Denmark. August 2010.
  • *Sablayrolles C., Vialle C., Silvestre J., Treilhou M., Lhoutellier C., Brochier V. Montrejaud-Vignoles M., Polychlorinated biphenyles uptake by carrots after sludge composts application: waste-case and operational practice in greenhouse conditions ; 36th International Symposium on Environmental Analytical Chemistry. Octobre 2010
  • Nathan Téné, Angélique Vétillard, Michel Treilhou - Recherche de résidus de pesticides dans la cire d'abeille : impact sur le couvain : Février 2009, Journée Scientifique Apicole, Saint-Avold
  • Vétillard A. Identification de gènes candidats du système immunitaire de l'abeille dans le phénomène de résistance à la varroase et élaboration d'un complément alimentaire palliatif de la déficience immunitaire. Mars 2009, Journée d'Ecologie de Toulouse.
  • Tabart J., Bolt M and Vétillard A. Implication de l'immunité des abeilles dans le degré de résistance à la varroase. Mars 2010, Journée Scientifique Apicole, ENV Nantes.
  • Tabart J., Bolt M., and Vétillard A. Implication de l'immunité des abeilles dans le degré de résistance à la varroase. Octobre 2010, Congrès National de l'Apiculture Française, Poitiers.
  • Tabart J., Bolt M., and Vétillard A. Implication de l'immunité des abeilles dans le degré de résistance à la varroase. Novembre 2010, Intervention séminaire ADAPRO-LR, Montpellier.
  • *Rifflet A, Gavalda S, Téné N, Orivel J, Leprince J, Guilhaudis L, Génin E, Vetillard A and Treilhou M. Structural identification by mass spectrometry and antibacterial activity of a peptide from the venom of the ant Tetramorium bicarinatum. Congrès national « Spectrométrie de Masse et Analyse Protéomique » Septembre 2011. Avignon.
  • Tabart J., Bolt M, Ferdy JB, Colin ME and Vetillard A. Links between Varroa destructor infestation and honeybee immunity. Novembre 2011, Journée d'Ecologie de Toulouse.
  • Bergougnoux M., Lautier L., Treilhou., Armengaud C., L'exposition au thymol diminue le comportement de phototaxie de l'abeille Apis mellifera. Journées scientifiques apicoles (Nantes ; juin 2012) accepté

Partenariats

Partenariats nationaux et internationaux

  • ADAPRO-LR: Association de Développement de l'Apiculture Professionnelle du Languedoc Roussillon
  • Dr John Kefuss et Mme Maria Bolt - Le Rucher d'Oc et le Rucher Bolt, Toulouse
  • Association du Conservatoire de l'Abeille Noire Bretonne, l'île d'Ouessant
  • Bee Research Institute Chinese Academy of Agricultural Science Beijing, Chine
  • SupAgro, Laboratoire de pathovigilance et de développement apicole - Montpellier, France
  • Linea Abejas de Chiaps, Ecosur, Mexique
  • Société APIREM, Saint-Juéry
  • Association de Développement Apicole en Midi-Pyrénées
  • RAGT/énergie, ALBI
  • CNRS, UMR Ecologie des Forêts de Guyane, Campus Agronomique, Kourou, France
  • Inserm U982, PRIMACEN Institut Fédératif de Recherches Multidisciplinaires sur les Peptides et Equipe de Chimie Organique et Biologie Structurale UMR 6014 CNRS, Institut de Recherche en Chimie Organique Fine (IRCOF), (IFRMP 23, Université de Rouen)
  • ThermoFisher Scientific, Courtaboeuf, France
  • FRE3213 Rapsodee, EMAC Albi

 

Contrats

  • Projet région APRTT sur 2 ans, porteur : A.VETILLARD
  • Projet régional Beethym sur 2 ans, partenariat avec le CRCT : M. TREILHOU
  • Projet Européen (communautaire apicole) sur 2 ans, porteur : A.VETILLARD
  • Projet Européen (communautaire apicole) sur 2 ans, en tant que partenaire A.VETILLARD


 

Equipements

Equipement analytique :

- HPLC détecteurs DAD et Fluorescence
- GC FID
- GC-MSn
- HPLC-MSn
- Polarimètre
- Spectrophotomètre UV Visible
- Spectrofluorimètre 96 puits (Técan)

Biotechnologie

- Thermocycler
- Thermomixer
- Hotte à flux vertical pour culture cellulaire
- Four à hybridation
- Etuve CO2 pour culture cellulaire
- Analyseur de gels

Microbiologie

- Poste de Sécurité Microbiologique
- Incubateur secoueur
- Autoclave
- Etuves de culture microbiologique

Froid

- Azote liquide
- Congélateurs : -80, -40, -20°C
- Lyophilisateur

Biochimie

- Centrifugeuses
- Speedvac
- Extracteur Solide Liquide ASE (Dionex)
- Postes d'électrophorèses : protéines et acides nucléiques
- Evaporateurs rotatifs,
- Armoire séchante

Theses

Thèses

 

  • Eva Schreck, "Influence des modes d'entretien du sol en milieu viticole sur le transfert  des pesticides vers les eaux d'infiltration - Impact sur les lombriciens" (2006/2008).
    3 articles indexés, 2 communications internationales (1 orale : EMEC-8-Ecosse + 1 affiche SETAC-6-Pologne
    http://thesesups.ups-tlse.fr/441/1/Schreck_Eva.pdf

 

  • Aline Rifflet, "Recherche de molécules à activités biologiques à partir de venins, allocation de recherche région" (2008-2012)
    Co-directeurs : Michel Treilhou (HDR : 50 %) et Angélique Vétillard (50 %)
    2 articles indexés (1 publié + 1 soumis) ; 2 communications par affiche (12 ICT - Barcelonne et SMAP - Avignon)

 

  • Gaël Charpentier, "Thymol et développement larvaire, bourse CIFRE" (2009-2012)
    Co-directeurs : Angélique Vétillard (100%) et C.Maranges (HDR)

 

  • Matthieu Campargue, (thèse industrielle, ED SEVAB) "Valorisation bioénergétique de biomasses : développement de technologies permettant de standardiser leur combustion" (2011-2013)
    Co-directeurs : Michel Treilhou (HRD-50%) et J. Escudero (50%).

 


    

       
    

      
	
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